Laboratorios de biología molecular y citogenética

1. Laboratorio de biología molecular.

1.1. EQUIPAMIENTO.

1.1.1. Específico. Consta de:

1.1.1.1. Termociclador: amplifica el ADN mediante PCR. Sus partes más destacables son:

1.1.1.1.1. Bloque incubador.

1.1.1.1.2. Tapa del bloque incubador.

1.1.1.2. Equipo de electroforesis en gel. Consta de:

1.1.1.2.1. Soporte plástico.

1.1.1.2.2. Cubeta de electroforesis.

1.1.1.2.3. Fuente de alimentación.

1.1.1.3. Documentador de geles. Consta de:

1.1.1.3.1. Transiluminador.

1.1.1.3.2. Cámara fotográfica

1.1.2. Genérico.

1.1.2.1. Cabina de bioseguridad (cabina de flujo laminar de clase II).

1.1.2.2. Sistema de purificación de agua.

1.1.2.3. Espectrofotómetro.

1.1.2.4. Microscopio de luz transmitida y fluorescencia.

1.1.2.5. Autoclave.

1.1.2.6. Incubador o estufa.

1.1.2.7. Baño termostático, termobloque y placa calefactora.

1.1.2.8. Centrífuga y microcentrífuga.

1.1.2.9. Neveras y congeladores de -20ºC y -80ºC.

1.1.2.10. Otros equipamientos como balanzas para reactivos y pHmetros.

1.2. La estructura del laboratorio consta de:

1.2.1. Sala de preparación de reactivos: es la sala "limpia".

1.2.2. Sala de preparación de muestras y extracción de ADN: es la sala "sucia".

1.2.3. Sala de PCR (termocicladores).

1.2.4. Sala de post-PCR (equipos de electroforesis y documentador de geles).

1.3. El flujo de trabajo: marca el sentido único de los procesos en el circuito de trabajo.

1.4. Las condiciones de trabajo

1.4.1. La contaminación de las muestra puede ser:

1.4.1.1. Cruzada

1.4.1.2. Por productos amplificados.

1.4.1.3. de los reactivos comerciales y del material fungible.

1.4.2. Normas para la manipulación de materiales y reactivos son:

1.4.2.1. Separación física de las áreas de trabajo y el flujo unidireccional entre ellas.

1.4.2.2. Utilizar solo los reactivos libres de nucleasas.

1.4.2.3. Llevar un control exhaustivo de los reactivos

1.4.2.4. Realizar controles negativos en todas las técnicas para controlar la contaminación por ADN.

1.4.3. Técnica aséptica (actividades para prevenir la contaminación).

1.4.3.1. Lavado de manos.

1.4.3.2. Uso de EPI.

1.4.3.3. Descontaminación de superficies.

1.4.3.4. Prevención de contaminación ambiental con cabinas de bioseguridad de clase II y puntas de micropipeta especiales.

1.4.3.5. Prevención de carryover.

1.5. El uso eficiente de los recursos debería contemplar los siguientes puntos mínimos:

1.5.1. Debe haber un plan de mantenimiento y de revisiones técnicas periódicas.

1.5.2. Asegurar la trazabilidad de los reactivos.

1.5.3. El personal debe recibir un adiestramiento adecuado y una formación continua.

1.5.4. Los procedimientos técnicos deben estandarizarse mediante procedimientos normalizados de trabajo que incluyan todos los aspectos de la técnica.

1.5.5. Gestión medioambiental para reducir los consumos de agua, electricidad y papel, y garantizar el correcto reciclado de los residuos de tipo urbano.

2. Laboratorio de citogenética y cultivos celulares.

2.1. El equipamiento:

2.1.1. Equipamiento específico para cultivos celulares:

2.1.1.1. Cabina de flujo laminar. Consta de:

2.1.1.1.1. Un panel frontal transparente.

2.1.1.1.2. Una rejilla frontal.

2.1.1.1.3. Un sistema mecánico.

2.1.1.1.4. Un filtro HEPA de gran superficie.

2.1.1.2. Incubador de CO2. Consta de:

2.1.1.2.1. Control de temperatura.

2.1.1.2.2. Recirculación del airea interior.

2.1.1.2.3. Control de CO2.

2.1.1.2.4. Control de humedad.

2.1.1.3. Microscopio invertido.

2.1.1.4. Equipo de criogenia.

2.1.2. Equipamiento específico para citogenética

2.1.2.1. Equipo de análisis de imagen. Consta de:

2.1.2.1.1. Microscopio óptico convencional.

2.1.2.1.2. Cámara digital.

2.1.2.1.3. Software específico.

2.1.2.2. Un microscopio óptico convencional y de fluorescencia.

2.1.3. Equipamiento común

2.1.3.1. Equipo de esterilización compuesto por:

2.1.3.1.1. Autoclave.

2.1.3.1.2. Sistema de filtración.

2.1.3.2. Sistema de purificación de agua.

2.1.3.3. Nevera y congeladores de -20ºC y -80ºC.

2.1.3.4. Otros equipamientos como centrífugas y placas calefactoras.

2.2. La estructura del laboratorio. Tres salas:

2.2.1. Sala de cultivos: es la sala "limpia".

2.2.2. Sala de laboratorio convencional: es la sala "sucia".

2.2.3. Sala de frío.

2.3. Las condiciones de trabajo: técnica aséptica. Algunos ejemplos son: lavado de manos, la puerta de la sala siempre cerrada y no introducir mecheros bunsen en las cabinas.

3. Biología molecular y citogenética.

3.1. La biología molecular estudia la composición, estructura y función de los ácidos nucleicos y proteínas.

3.2. La citogenética estudia la estructura, función y comportamiento de los cromosomas en metafase.

3.3. La Unidad de Genética es la unidad asistencial que está dedicada a la realización de pruebas genéticas y la emisión de los dictámenes correspondientes con fines diagnósticos.

4. La seguridad en el laboratorio.

4.1. Bioseguridad: todas las normas, técnicas, prácticas y hábitos de trabajo que intentan evitar la exposición accidental del personal a agentes biológicos muy peligrosos o su liberación al medio ambiente.

4.2. Seguridad química

4.3. Equipamiento y normas de seguridad.

4.4. El manual de seguridad: es un documento de obligado conocimiento de todo el personal del laboratorio.

4.5. Gestión de residuos: incluye medidas para la recogida, clasificación y almacenamiento temporal de residuos hasta su recogida.