Técnicas de purificación de enzimas

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Técnicas de purificación de enzimas 저자: Mind Map: Técnicas de purificación de enzimas

1. Carga iónica

1.1. Cromatografía de intercambio iónico

1.1.1. Moléculas cargadas se adhieren a los intercambiadores de forma reversible de modo que dichas moléculas pueden ser asociadas o disociadas

1.2. Electroforesis

1.2.1. Migración proporcional de las moléculas por el movimiento generado por el campo eléctrico.

2. De acuerdo a sus propiedades

2.1. Solubilidad

2.1.1. Salting in

2.1.1.1. Concentración baja de iones

2.1.2. Salting out

2.1.2.1. Interacciones fuertes

2.2. Polaridad

2.2.1. Cromatograía de absorción

2.2.1.1. La retención de una especie química en los sitios activos de la superficie de un sólido.

2.2.2. Cromatografía en papel

2.2.2.1. Separación de dos o más compuestos con propiedades físicas diferentes

2.2.3. Cromatografía en fase reversa

2.2.3.1. Interacciones hidrofóbicas que resultan de las fuerzas de repulsión entre un disolvente

2.2.4. Cromatografía en interacción hidrofóba

2.2.4.1. Fuerzas no covalentes más importantes que pueden estar relacionadas con diferentes procesos

2.3. Tamaño molecular

2.3.1. Diálisis y ultrafiltración

2.3.1.1. Consiste en el paso simultáneo a través de la membrana de diálisis del solvente

2.3.2. Electroforesis en gel

2.3.2.1. Migración proporcional de las moléculas a través de un gel

2.3.3. Cromatografía de filtración en gel

2.3.3.1. Migración proporcional de las moléculas

2.3.4. Ultracentrifugación

2.3.4.1. Partículas más densas que el disolvente serán sedimento, mientras que aquellos que son menos densas flotarán.

2.4. Especifidad de unión

2.4.1. Cromatografía de afinidad

2.4.1.1. Fase estacionaria y fase movible.

3. Fases de purificación

3.1. Fase 1

3.1.1. Captura

3.2. Fase 2

3.2.1. Intermedia

3.3. Fase 3

3.3.1. Perfeccionamiento

4. Fraccionamiento cromatografía

4.1. Forma y tamaño

4.1.1. Filtración por gel

4.2. Carga neta

4.2.1. Intercambio iónico

4.3. Punto isoeléctrico

4.3.1. Cromatoenfoque

4.4. Hidrofobicidad

4.4.1. Interacción hidrofóbica

4.5. Función biológica

4.5.1. Afinidad

4.6. Antigenicidad

4.6.1. Inmunoadsorción

4.7. Glicosilación

4.7.1. Lectinas inmovilizadas

4.8. Grupos sulfrididos libres

4.8.1. Covalente

4.9. Capacidad para ligar metales

4.9.1. Quelatos metálicos

5. Separar una enzima de interés de una mezcla de estas.