Microscopia y Crecimiento microbiano
by Ana Lucia
1. Preparacion de muestra
2. Tinciòn: significa colorear los microorganismos. Antes de teñirlos se debe fijar a porta objetos. Al extendido se agrega un colorante. Los colorantes son sales compuestas por un catiòn y aniòn, (violeta de genciana, azul de metileno, verde de malaquita y safranina).
3. Tipos de Tinciòn: Tinciòn simple, Diferencial, especial.
4. Tinciòn simple: solucion acuosa o alcoholica de un color antebasico unico, sirve para ver formas y estructuras. Diferencial: se utiliza para establecer clases de diferentes bacterias las mas importantes son: tinciòn gram, acido-alcohol risistencia, ziehl-nelsen.
5. Tinciòn Gram: Clasifica las bacterias en dos grandes grupos. Gram positivas: retienen el color del colorante violeta. Gram negativo: no retiene el colorante y permanecen incoloras hasta que se agrega safranin.
6. Tinciòn ácido alcohol resistente: se fija firmemente solo a las bacterias que poseen ceras en la pared celular. Bacterias ácido alcohol resistente: una vez teñidas con rojo car-bol fucsina retienen el colorante y aparecen rojas. Bacteria no ácido alcohol resistente: Tratadas de igual forma pero con azul metileno como colorante de contraste aparecen de color azul.
7. Tinciòn de endoesporas: la tinciòn mas comun es Shaeffer-Fulton para endoesporas las cual se utiliza verde malaquita como colorante primario. Se elimina con agua y se agrega safranina. Se observan verdes dentro de células rojas.
8. Requerimientos para el crecimiento miciribiano
9. Requerimientos para el crecimiento microbiano: Requerimiento Físico( temperatura, PH, presión osmótica), requerimiento químico (FUENTE DE C,O,N,P,S, oligoelementos y factores de crecimiento orgánico).
10. Temperatura: existen tres tipos de temperatura mínima, optima y máxima. Las mejores practicas de conservación de alimento son la refrigeración y la congelación. Requerimiento químico: el carbono y el agua estructuras básicas de la materia prima 50% del peso seco. Oligoelemtos: esenciales para la fincion enzimatica como cofactores (Fe, Cu, Mo, Zn)
11. Factores de crecimiento orgánico: Vitaminas para algunas bacterias, aminoacidos, purinas, pirimidinas.
12. Medios de Cultivo:
13. Medio químicamente definido: Es el que se conoce la composición química exacta, sirve para que crezca MO específicos. Medio Complejo: Compuesto por nutrientes como extracto de levaduras carnes, plantas, cultivo de bacterias heterotrofas y hongos puede ser de forma liquida: caldo nutritivo. Forma solida: agar nutritivo. Medio Selectivo: suprime el crecimiento de bacterias no deseadas. Medio diferencial: permite distinguir con mayor facilidad las colonias de MO.