1. Tecnica bastante ultilizada atualmente
1.1. Consiste na replicação(AMPLIFICAÇÃO) DNA dentro de vários ciclos.
2. TECNICAS
2.1. PCR Convencional
2.1.1. Extensão do material do DNA
2.1.2. TaqPolimerase
2.1.3. A visulização do material pode ser por espectrofotometro(quantificação) ou eletroflorese.
2.1.3.1. Eletroflorese: visualização da amostra.
2.1.3.2. Espectrofometro: Capta a absorção da luz.
2.2. NESTED PCR
2.3. RT-PCR
2.3.1. Transcriptase reversa
2.3.2. Pode detectar um gene especifico.
2.3.3. Usa o RNA ao inves do DNA
2.3.4. Expressão e amplificação do RNA mensageiro
2.4. PCR-RFLP
2.4.1. Posssivel detectar um polimorfismo entre individuos
2.4.2. Duas etapas
2.4.2.1. PCR convencional
2.4.2.2. Digestão da enzima de restrição
2.5. qPCR
3. Aparelho utilizado
3.1. TERMOCICLADOR
4. Componentes utilizados
4.1. DNA TEMPLATE (modelo)
4.1.1. Material a ser replicado
4.2. Primers
4.2.1. Delimitam a área que irá ser duplicada e sinaliza a TAQ onde serão colocados os nucleotideos
4.3. Taq Polomerase
4.3.1. Coloca os núcleotidios complementares
4.4. MgCl²
4.4.1. Estabiliza a interação prime e do DNA modelo.
4.5. Nucleotideos
4.5.1. Também chamados de DNTP's eles serão incorporados na fita nova.
4.6. Tampão
5. Organizada em 3 etapas:
5.1. Desnaturação
5.1.1. Aquecimento da amostra (a fita de DNA se abre)
5.2. Anelamento
5.2.1. Diminui a temperatura e os primes se reconhecem e se anelam
5.3. Extensão
5.3.1. Aumento da temperatura, entra enzima catalizador e os nucleotideos são adcionados a nova fita.