BIOLOGÍA MOLECULAR EN MICOLOGÍA MÉDICA
作者:Pablo Rayo
1. Análisis del polimorfismo del ADN amplificado con cebadores arbitrarios (RAPD): detalla la amplificación simultánea de múltiples fragmentos de ADN nuclear mediante PCR, utilizando para ello un único cebador. Alta especificidad ya que usa temperatura de 35 a 39°C para unión.
2. Se pensaba que las infecciones micoticas no tenian relevancia medica, sin embargo se comprobó que es muy común y que requiere de estudios para fortalecer los conocimientos.
3. Los analisis moleculares se puede complementar electroforesis en geles de agarosa, Northern Blot, Southern Blot
4. Las técnicas genéticas utilizadas en la identificación de especies y géneros de hongos pueden ser RFLP, PCR, PCR-RFLP, PCR-SSCP o RAPD.
5. Los avances tecnológicos se han relacionado con la ultramicroscopia, así como con instrumentos permitiendo analizar características inmunológicas y bioquímicas de los hongos
6. Polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restricción (RFLP): implementa el análisis de patrones de bandas, derivados de la ruptura de sus respectivos ADNs. Las enzimas de restricción están presentes, por lo tanto Cuanto menor sea el tamaño de la secuencia nucleotídica, mayor será el número de fragmentos.
7. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR): genera in vitro un gran número de copias de fragmentos específicos de ADN. Se rige a un protocolo; desnaturalización del ADN a 90°C, específica de cebadores, extensión de la cadena de ADN con Taq polimerasa.
8. Análisis del polimorfismo en la longitud de los fragmentos dé restricción de regiones amplificadas por PCR (PCRRFLP): se procesa la PCR para después someterla a las enzimas de restricción; así es mas fácil el reconocimiento de los perfiles de ADN y localizando al patógeno. Fusiona la técnica PCR y RFLP.
9. Análisis del polimorfismo en la conformación de las cadenas sencillas de ADN de regiones amplificadas por PCR (PCR-SSCP): se basa en la relación entre la movilidad electroforética de una hebra de ADN monocatenario (ADNmc) y su conformación que es un reflejo de su secuencia nucleotídica