1. Curva de maturacao
1.1. 64 x 14
1.2. 14 x 33
1.3. DR x 11b
1.3.1. Com gate booleano pra Grans+Monos
2. Vai perdendo o 105 e diminuindo o SSC de acordo o amadurecimento
3. Neutrofilos
3.1. Gate no 45+
3.2. Curvas de maturacao
3.2.1. 13 x 16
3.2.2. 13 x 11b
3.2.3. 11b x 16
3.2.4. 117 x DR
3.2.5. 11b x DR
3.2.5.1. Com gate booleano pra Grans+Monos
3.2.5.2. 64 sem 14 = Componente mais imaturo
3.3. Precursor mieloide
3.3.1. 117 x DR (+/+)
3.3.2. Gate no +/+ com o 45fraco tbm!
3.4. Outros grupos
3.4.1. MastocitoMastocito
3.4.1.1. 117+++ x DR+/-
3.4.2. Eosinofilo
3.4.2.1. 45+/- com 16-
3.4.2.2. Atencao a autofluorescencia
3.4.2.2.1. LMA-M3 tbm
3.5. Obs
3.5.1. Utilidade do CD15 = Ele diz certinho aonde estao os neutrofilos!
3.5.1.1. Util pegar com 34 tbm
3.5.1.2. Importante no tubo de monocitos no lab para uma boa separacao tbm
4. Monocitos
4.1. Gate no 64l+
4.2. Obs
4.2.1. Acima de 10% deve-se smp suspeitar de LMMC
4.2.2. Muito bom = CD300e
5. Eritrocitos
5.1. Curva de maturacao
5.1.1. 71 x 36
5.1.2. 105 x 36
5.1.3. 105 x 71
5.1.4. 117 x DR
5.1.4.1. Gate nos eritroblastos
5.2. Gate no 45- e no 71+
5.3. Raciocinio
5.3.1. O mais maduro tem o 71x36 mais forte
5.4. Outros grupos
5.4.1. 123+
5.4.1.1. Receptor para IL-3
5.4.1.1.1. Marca basofilo, cels dendriticas e HCL tbm
5.4.1.2. 123 x DR - Gate 123+
5.4.1.2.1. DR- Basofilo
5.4.1.2.2. DR+ Celulas dendriticas
5.4.1.3. Raciocinio
5.4.1.3.1. DR é uma proteina MHC, e dendritica é uma APC, enquanto basofilo nao!
5.4.1.4. Na duvida para aberrancia =
5.4.1.4.1. Por no gate de linf, pq no 45 fraco/neg pode ser prec.eritroide
5.5. Obs
5.5.1. Avaliar a normalidade na curva de maturacao principalmente pelo RedScore
5.5.1.1. E o formato esperado da curva em si dps
6. Linfocitos
6.1. B
6.1.1. Maturacao =
6.1.1.1. 38 x 81
6.1.1.2. 10 x 34
6.1.1.2.1. preB1 no duplo+ para preB2, preB3 e madura no duplo-
6.1.2. Precursores - Hematogonia
6.1.2.1. 19 x 10 (+/+)
6.1.2.1.1. Hematogonia
6.1.2.2. Obs
6.1.3. Maduras
6.1.3.1. Ver com CD20
6.1.3.2. S/ CD20 = Entender ontogenia para contornar
6.1.3.2.1. 45 x 10
6.1.3.2.2. 45 x 34
6.1.3.2.3. 38 x 45
6.1.3.2.4. 34 x 38
6.1.4. Obs
6.1.4.1. 34 x 19
6.1.4.1.1. +/- =
6.1.4.1.2. -/+ =
6.1.4.2. Marcou 19 e nao 10?
6.1.4.2.1. Investigar pro-B
6.1.4.3. LLC perde expressao de 79b
6.1.4.3.1. LinfB normal nao marca 23 ou FMC7
6.2. T
6.2.1. Precursores
6.3. Obs
6.3.1. Pop negativa no CD5 smp deve ser investigada
6.3.1.1. Dae gates no 5 com 3 e 19
6.3.2. Na MO nao ha relacao 4/8
6.3.2.1. pq n maturam ou se originam da medula
6.3.2.2. assim n ha referencia deles na MO
7. Se esperar encontrar mts pos TMO e em criancas
8. NK
8.1. Gate no
8.1.1. 16+ no SSCbaixo
8.2. Curva de maturacao
8.2.1. 16 x 56 (+/+)
8.3. Obs
8.3.1. NK-T é mais relevante no contexto de imunodeficiencias
8.3.1.1. Em outros nem tanto
9. Plasmocitos
9.1. 38 x 138
9.1.1. +/+ ou -/+
9.2. Smp averiguar LBmad p/ ter ctz do KxL
10. Scores
10.1. Red Score
10.1.1. CV até 80% p/ 71
10.1.1.1. 3
10.1.2. CV<65% p/ 36
10.1.2.1. 2
10.1.3. Anemia
10.1.3.1. 2
10.2. Ogata Score
10.2.1. Média do SSC deve ser de ~6
10.2.1.1. 1
10.2.1.1.1. SSCratio =
10.2.2. MIF linfoc/mielobl deve ser entre 4-7
10.2.2.1. 1
10.2.3. PrecB deve ser >2% em uma MOnormal
10.2.3.1. 1
10.2.4. PrecMieloide deve ser <2% em uma MOnormal
10.2.4.1. 1
10.2.5. SUGESTIVO DE SMD =
10.2.5.1. Entre 2-4 pontos
10.3. Score Matutes
10.3.1. In the Matutes score system
10.3.1.1. positivity of CD23 and CD5
10.3.1.2. and weak or absent expression of CD79b (or CD22), FMC7 and SmIg
10.3.1.3. are converted to a score of 0 - 5 and interpreted as CLL in patients with a score greater than 3. (14)
10.3.2. In ambiguous immunophenotypes, the markers, such as CD43, CD79b, CD81, CD200 or ROR1, may help to refine the diagnosis.6
10.3.3. Atencao, é um score de 1994, entao ha mais marcadores para maior refino ao definir uma LLC
11. Obs
11.1. SEMPRE ENTENDER A ONTOGENIA DAS CELULAS PARA PODER APLICAR EM MULTIPLAS PERSPECTIVAS
11.2. CD45-
11.2.1. Fora eritroblastos...
11.2.1.1. Tumor solido? Metastase? Debree?
11.3. 123 pra aberrancia
11.3.1. Tbm marca basofilos e celulas dendriticas
11.4. Pos QT, as 1s pop's a voltarem sao de hematogonias e monocitos
11.4.1. Nisso ficam aumentadas
11.4.2. Focar smp em ver blastos
11.5. Sempre se atentar a populacoes criticas pela questao do overlay
11.5.1. Ajuste de compensacao para verificar se sao celulas ou ''artefatos''
11.6. Deve-se ficar atento a coisas estranhas na marcacao intracitu com base na fracao Mu que marca inespecifico
11.7. Pops ou marcam 5 ou 10, ambos nao (do que foi visto ate agr)
11.7.1. a n ser 2 doencas simultaneas com padroes diferentes de marcacao
11.8. 56 estourado ou grande 45 negativo pode ser indicativo de metastase ou celulas nao hematopoieticas, oq smp requer maiores investigacoes
11.9. Para aguda tem que se partir de BLASTO
11.9.1. Se nao é LLC/DLPC ou LMC/SMD...
11.10. LMA disseminada pode gerar sarcomas com certa frequencia estatistica
11.10.1. Como o granulocitico
11.11. Blastos cuplike ou com mutacao NPM1 nao marcam 34!
11.12. Sempre comparar as proporcoes entre tubos para ter ctz dos percentuais
11.12.1. Ajustar se algo fugir mto da 'media'esperada
11.13. Sempre verificar aberrancia
12. Obs mais a parte
12.1. Track e Crack sao os uncios genes que tendem a ser pedidos em imunodeficiencies
12.1.1. outros sao mto mais raros
13. HPN
13.1. Indica deficiencia de GPI
13.1.1. Afeta linhagens que o expressam, em especial para sp:
13.1.1.1. Neutrofilos
13.1.1.1.1. CD64+ para isolar
13.1.1.2. Monocitos
13.1.1.2.1. CD15+ para isolar
13.1.1.3. Eritrocitos
13.1.1.3.1. CD235+ para isolar
13.1.2. Graficos em log devido os eritrocitos
13.2. No geral
13.2.1. Espera-se que todos percam expressao (DuploNeg) para:
13.2.1.1. CD157
13.2.1.2. FLAR-AF488
13.2.2. Alem disso
13.2.2.1. Eritrocitos podem perder expressao de CD59 tbm