1. DENGUE
1.1. Tansmitido por una picadura de mosquito, genero Aedes, especie Aegypti
1.1.1. 50% de la población mundial en riesgo
1.1.1.1. OPS (2020) reportó 1.6 millones de casos nuevos en las americas
1.1.2. Origen en Africa
1.2. Generado por un virus de ARN del genero flavirius, familia flaviviridae
1.2.1. 5 serotipos
1.2.1.1. De DENV-1 a DENV-5
1.2.1.2. DENV-1 cuenta con altas tasas de mutación
1.3. DENV puede ser asintomatico o producir cuadros febriles, aumento de permeabilidad vascular, hemorragia, muerte.
2. PCR (Reacción en cadena de polimerasa)
2.1. Amplia en masa fragmentos de determinado ADN por ciclos repetitivos y temperaturas especificas
2.1.1. - Desnaturalización (94º) - Alineamiento de primeros cebadores (45-55º) - Extensión (72º)
2.2. Enzima: DNA polimerasa
2.3. Esta tecnica ofrece sensibilidad y especificidad debido al tamaño pequeño de las muestras
2.3.1. Detecta presencia de microorganismos y permite ampliar el microorganismo Diana de forma rapida
3. REVERSO TRANSCRIPCIÓN- PCR (RT-PCR)
3.1. A partir de un ADN se obtiene un ADN complementario (ADNc)
3.2. Enzima: transcriptasa reversa (polimerasa ADN-ARN dependiente)
3.2.1. En el primer ciclo se usan los hexameros de oligonucleotidos como cebadores
3.2.1.1. Estos se unen a cualquier parte del ARN de molde
3.2.2. Al obtener ADNc se amplifica con ADN polimerasa
4. NUCLEID ACID TEST (NAT)
4.1. Detecta presencia de material genetico del virus en la sangre
4.1.1. Actuan como marcadores de replicación viral
4.1.2. Indican la respuesta del virus ante una terapia con drogas y pueden predecir la respuesta a tratamiento
4.1.3. Parte de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
5. RT-PCR/ ELISA
5.1. Es la más usada en diagnósticos de rutina
5.1.1. Resultados cualitativos y semi-cuantitativos
5.2. Para anticuerpos IgM e IgG son los estándares para el análisis serológico de las infecciones del virus dengue
5.2.1. Sensibilidad de 78% para detectar la IgM y variable para IgG
5.3. Se usa una enzima que reacciona con un sustrato especifíco
5.3.1. Produce un cambio de color del cromógeno, lo que evidencia la formación de inmunocomplejos.
6. CONCLUSIÓN
6.1. Las pruebas serológicas se siguen utilizando en la detección de la infección por el virus dengue por su bajo costo y simplicidad
6.2. En centros de investigación y laboratorios las tecnicas moleculares hacen mas sencillo el diagnostico
6.3. La RT-PCR es la tecnica mas usada
6.3.1. - Alta sensibilidad y especificidad - Requiere pocas muestras para su aplicación
7. MÉTODO
7.1. Busqueda de articulos de forma sistematica- método PRISMA
7.1.1. Buscando precisar las tecnicas moleculares determinadas en la literatura para el diagnostico de dengue. (2010- 2022)
7.2. Bases consultadas
7.2.1. PubMed, Sciencedirect, google academico
7.3. Criterios de inclusión y exclusión
7.4. Propiedades y valores que se consideraron para elegir la información
7.4.1. Año de publicación, país, datos demográficos, tamaño de la muestra, prueba utilizada, tiempo de detección, tipo de muestra, serotipo/ antígeno detectado
8. RESULTADOS
8.1. 2,084 articulos encontrados
8.1.1. 15 articulos validados para extraer información
8.2. Tecnicas más usadas para el diagnostico de dengue
8.2.1. - RT–PCR (71,43%) - RT–PCR en conjunto con ELISA (14,29%) Otras: PCR anidad y NAT (7,14%)
8.3. Materiales biologicos usados para llevar a cabo las tecnicas
8.3.1. - Muestras de sangre (46,3%) - plasma (27%) - Suero y tejido (6,7%)
8.4. Variabilidad de los blancos moleculares usados en las tecnicas
8.4.1. Fueron diagnosticados 4 serotipos DENV con las pruebas de PCR, RT-PCR y ELISA
8.4.2. Los blancos moleculares IgM e IgG se diagnosticaron por RT-PCR y ELISA
9. DISCUSIÓN
9.1. Radica en la importancia de las tecnicas moleculares para la detección de DENV y sus serotipos
9.2. Se considera la importancia de la proteína NS1 como marcador para el diagnóstico del virus de dengue
9.2.1. La sensibilidad del antígeno NS1 para el diagnostico presenta mayor tasa que ImG ELISA y la PCR