1.1. NA CLIVAGEM REDUZ-SE A DIMENSÃO DOS FRAGMENTOS DOS TECIDOS COLETADOS, PODENDO TER DE 3mm A 5mm DE ESPESSURA. ESSE PROCESSO FACILITA A PENETRAÇÃO DOS FIXADORES.
2. 5. INCLUSÃO
2.1. A INCLUSÃO SE BASEIA EM COLOCAR OS TECIDOS QUE FORAM INFILTRADOS, DENTRO DE UM MOLDE COM PARAFINA LÍQUIDA. PARA UMA BOA INCLUSÃO, OS FRAGMENTOS DEVEM ESTAR COMPLETAMENTE DESIDRATADOS.
3. 6. MICRONOTOMIA
3.1. CONSISTE EM SECCIONAR OS TECIDOS EM FATIAS BEM FINAS E UNIFORMES, RECOMENDANDO-SE A ESPESSURA DE 4 A 6 MICRÔMETROS.
4. 7. COLORAÇÃO
4.1. SÃO IMPORTANTES FERRAMENTAS QUE AUXILIAM NA VISUALIZAÇÃO, VISTO QUE APÓS A MICROTOMIA, OS MATERIAIS FICAM NORMALMENTE TRANSPARENTES. EXISTEM OS CORANTES ÁCIDOS (ACIDÓFILO) E OS BÁSICOS (BASÓFILO) SENDO A EOSINA E HEMATOXILINA, RESPECTIVAMENTE.
5. 8. SELAGEM
5.1. PODEM SER PERMANENTES OU PROVISÓRIOS. OS PERMANENTES SÃO HIDROFÓBICOS, SENDO NECESSÁRIO REMOVER TODA A ÁGUA, JÁ OS PROVISÓRIOS SÃO HIDROFÍLICOS, NÃO NECESSITANDO DA REMOÇÃO DA ÁGUA E SENDO DESCARTADOS APÓS A OBSERVAÇÃO.
6. 9. OBSERVAÇÃO
6.1. ESSA É A ÚLTIMA ETAPA E TAMBÉM DEVE SER FEITA CAUTELOSAMENTE. É NECESSÁRIO QUE SE TENHA CONHECIMENTO DA ESTRUTURA A SER OBSERVADA E TAMBÉM DO APARELHO A SER UTILIZADO, COMO O MICROSCÓPIO DE LUZ.
7. 1. OBTENÇÃO DO MATERIAL
7.1. CONSISTE EM REMOVER AMOSTRAS DE TECIDO DE UM DETERMINADO ORGANISMO, COMO O CONJUNTIVO, CARTILAGINOSO, SANGUÍNEO E ÓSSEO. PODE SER FEITA QUANDO O ORGANISMO AINDA ESTÁ VIVO OU POST MORTEM
8. 2. FIXAÇÃO DO MATERIAL
8.1. O MATERIAL SERÁ FIXADO NA LÂMINA, NORMALMENTE COM O USO DE FORMOL OU O COM O LÍQUIDO DE BOUIN COM A FINALIDADE DE IMOBILIZAR OS CONSTITUINTES DAS CÉLULAS, INTERROMPENDO O PROCESSO DE AUTÓLISE E FORNECENDO MAIS RESISTÊNCIA PARA AGUENTAR AS PRÓXIMAS ETAPAS E MANTER A ARQUITETURA ORIGINAL.
9. 4. PROCESSAMENTO
9.1. CONSISTE NA DIFUSÃO DOS REAGENTES PARA O INTERIOR DOS TECIDOS E A REMOÇÃO DO LÍQUIDO TECIDUAL QUE É O PRÓPRIO FIXADOR EMPREGADO.
9.2. 4.1 DESIDRATAÇÃO: REMOÇÃO DE ÁGUA DOS TECIDOS PARA INCLUSÃO DE PARAFINA, JÁ QUE É UMA SUBSTÂNCIA APOLAR.
9.3. 4.2 DIAFANIZAÇÃO: REMOÇÃO COMPLETA DO ÁLCOOL PARA AS ETAPAS SEGUINTES, POIS A PARAFINA NÃO SE MISTURA HOMOGENEAMENTE COM ÁLCOOL.
9.4. 4.3 INFILTRAÇÃO: É UMA ETAPA IMPORTANTE DA INCLUSÃO DA PARAFINA E PARA QUE ESTA OCORRA, O MATERIAL DEVE SER AQUECIDO POR VOLTA DE 56°, JÁ QUE A PARAFINA EM TEMPERATURA AMBIENTE É SÓLIDA.
