1. PEÇAS CIRÚRGICAS
2. Coleta
2.1. AMOSTRAS DE ORGANISMO VIVO OU MORTO
2.1.1. RETIRADA DE PARTE DOS TECIDOS
2.1.1.1. NECRÓPSIA
2.1.1.2. BIÓPSIAS
3. Fixação
3.1. PRESERVAÇÃO DOS TECIDOS
3.1.1. MANTER AS BIOMACROMOLÉCULAS O MAIS PRÓXIMO DA SITUAÇÃO "IN VIVO"
3.1.2. EVITAR AUTÓLISE E PROLIFERAÇÃO BACTERIANA
3.1.2.1. FIXAÇÃO FÍSICA
3.1.2.1.1. AQUECIMENTO
3.1.2.1.2. RESFRIAMENTO
3.1.2.2. FIXAÇÃO QUÍMICA
3.1.2.2.1. AÇÃO DE AGENTES QUÍMICOS
3.2. PARAR O METABOLISMO CELULAR
3.3. PRESERVAR A IDENTIDADE DAS CÉLULAS
3.4. MELHORAR A DIFERENCIAÇÃO ÓPTICA
3.5. PRESERVAR ANTÍGENOS
4. Clivagem
4.1. REDUÇÃO DE TAMANHO E ESPESSURA DOS FRAGMENTOS FIXADOS (CORTES UNIDIRECIONAIS)
4.1.1. PENETRAÇÃO DO FIXADOR E MELHOR DIFUSÃO DOS REAGENTES
4.1.1.1. RETIRA A AMOSTRA DO FIXADOR E PROCEDE A LAVAGEM ADEQUADA
4.2. Descalcificação
4.2.1. IMERSÃO DO TECIDO ÓSSEO EM DESCALCIFICADORES, SOLUBILIZANDO O CÁLCIO
4.2.1.1. ÁCIDOS FRACOS
4.2.1.1.1. EM TECIDOS DE MATRIZ ÓSSEA MENOS DENSA
4.2.1.2. ÁCIDOS FORTES
4.2.1.2.1. EM TECIDOS DE MATRIZ ÓSSEA MAIS DENSA; COM AÇÃO RÁPIDA MAS CAUSA DANOS AO TECIDO
4.2.1.3. HISTOQUÍMICOS
4.2.1.3.1. EDTA - NÃO CAUSA DANOS AO TECIDO
5. Processamento
5.1. SUBSTITUIR A ÁGUA QUE SE ENCONTRA NOS TECIDOS POR UM MEIO MAIS SÓLIDO (PARAFINA)
5.1.1. DESIDRATAÇÃO
5.1.1.1. COMPLETA REMOÇÃO DA ÁGUA POR AGENTES DESIDRATANTES
5.1.1.1.1. ETANOL
5.1.2. CLARIFICAÇÃO
5.1.2.1. RETIRADA DO ETANOL COM XYLOL
5.1.2.1.1. PENETRAÇÃO DA PARAFINA COMPLETAMENTE NO INTERIOR DOS TECIDOS
5.1.3. INFILTRAÇÃO
5.1.3.1. SATURAÇÃO DAS CAVIDADES DOS TECIDOS E CÉLULAS POR MEIO INFILTRANTE
5.1.3.1.1. PARAFINA LÍQUIDA
5.2. MANUAL
5.2.1. MONITORAR A CONCENTRAÇÃO DOS REAGENTES PERIODICAMENTE
5.3. AUTOMÁTICO
5.3.1. OTIMIZAÇÃO DO TEMPO
5.3.1.1. 2 TIPOS
5.3.1.1.1. O CARROSSEL
5.3.1.1.2. E O DE TRANFERÊNCIA DE FLUÍDO
6. MICRÓTOMO COM CORTES DE 1 A 60 MICRÔMEROS
6.1. NAVALHAS DE
6.1.1. DESCARTÁVEIS
6.1.1.1. MELHOR QUALIDADE
7. 1 PASSO: LÂMINAS DEVEM SER IDENTIFICADAS, LAVADAS E SECADAS
8. 7 PASSO: LEVAR OS CORTES PARA A ESTUFA ( MÍN. 2HORAS)
8.1. 8 PASSO: PASSAR OS BLOCOS NA PARAFINA PARA CORRETO ARMAZENAMENTO
9. OS BLOCOS SERÃO SECCIONADOS EM FATIAS FINAS PERMITINDO A VISUALIZAÇÃO DAS CÉLULAS E ELEMENTOS EXTRACELULARES
9.1. 2 PASSO: RETIRAR O EXCESSO DE PARAFINA DO BLOCO COM UMA NAVALHA VELHA
9.1.1. 3 PASSO: RESFRIAR O BLOCO PARA O CORTE
9.1.1.1. 4 PASSO: FAZER OS CORTES COM UMA NAVALHA NOVA
9.2. PROFISSIONAL TREINADO E EQUIPAMENTOS ESPECÍFICOS
9.2.1. CUIDADOS DE EXECUÇÃO DE CORTE DE QUALIDADE
10. NÚCLEO EM AZUL E CITOPLASMA EM RÓSEO
10.1. MECANISMO FÍSICO
10.2. MECANISMO QUÍMICO
10.2.1. HEMATOXILINA E EOSINA
10.2.1.1. HEMATOXILINA DE HARRIS
10.2.1.1.1. COLORAÇÃO REGRESSIVA QUE NECESSITA DE DIFERENCIAÇÃO
10.2.1.2. HEMATOXILINA DE MAYER
10.2.1.2.1. COLORAÇÃO PROGRESSIVA QUE NÃO NECESSITA DE DIFERENCIAÇÃO
11. Inclusão
11.1. TECIDO INSERIDO EM MOLDE COM PARAFINA FUNDIDA PARA A SOLIDIFICAÇÃO DO MESMO
11.1.1. 2 MÉTODOS
11.1.1.1. MANUAL
11.1.1.1.1. PARAFINA RETIRADA DA ESTUFA
11.1.1.2. EQUIPAMENTO
11.1.1.2.1. CENTRAIS DE INCLUSÃO
12. Microtomia
13. Coloração
13.1. OS CORTES DEVEM SER CORADOS PARA TORNÁ-LOS VISÍVEIS AO MICROSCÓPIO
13.1.1. SOLUÇÕES CORANTES
13.1.2. 1 PASSO: DESPARAFINAÇÃO
13.1.2.1. 2 PASSO: HIDRATAÇÃO
13.1.2.1.1. 3 PASSO: COLORAÇÃO
14. Selagem
14.1. ACONDICIONAR AS LÂMINAS EM UM MEIO PERMANENTE
14.1.1. GOMA DE DAMAR
14.1.1.1. E RECOBRIR A LÂMINA COM UMA LAMÍNULA PARA TORNAR A SUPERFÍCIE PLANA