ANÁLISES MICROBIOLÓGICAS
por Juliana Ribeiro
1. Microscopia de Luz
1.1. células são as menores unidades morfológicas e fisiológicas dos seres vivos.
1.2. O diâmetro das células varia de 5 a 20 μm e, portanto, só podem ser observadas a partir de microscópios
1.3. estruturas celulares interagem a com a luz
1.4. uso de corantes é o método mais comumente utilizado no preparo de lâminas
1.5. A cor apresentada pela molécula de um corante é atribuída à presença de grupos cromofóricos (ou cromóforos)
1.6. Corantes vermelhos, por exemplo, apresentam intensa absorção de luz.
2. Preparações Microscópicas a Fresco.
2.1. As preparações microscópicas compreendem técnicas pelas quais espécimes microbianos são colocados sobre lâminas para observação ao microscópio
2.2. As preparações a fresco utilizam micro-organismos suspensos em meio líquido, que podem ser examinados vivos, com o auxílio ou não de corantes vitais
2.3. Nas preparações fixadas, as etapas de preparo do esfregaço e fixação antecedem a coloração das células microbianas
3. Preparo e Esterilização de Materiais e Meios de Cultura
3.1. Os micro-organismos podem ser cultivados in vitro
3.2. O cultivo in vitro é importante para criar condições que favoreçam o desenvolvimento de culturas fora do seu ambiente de origem
3.3. Os meios de cultura devem possuir todos os elementos necessários para o crescimento microbiano, incluindo C, N, P e S
3.4. O meio mínimo (MM) fornece somente os nutrientes essenciais para o desenvolvimento das células.
3.5. O meios diferenciais permitem diferenciar espécies microbianas com base em características fenotípicas;
3.6. O meios de enriquecimento favorecem o crescimento de uma determinada espécie microbiana em relação a outras espécies
3.7. Os meios de cultura podem ser líquidos (caldos), sólidos ou semi-sólidos (ágar).
4. Normas Gerais de Segurança e Boas Práticas de Laboratório
4.1. uso do jaleco é obrigatório
4.2. sapatos fechados e roupas com um comprimento adequado
4.3. Não coma, beba, fume no laboratório
4.4. Lave as mãos antes e após o trabalho prático
5. Preparo e Lavagem de Materiais e Utensílios
5.1. higienização envolve dois processos primordiais, a limpeza e a sanitização.
5.1.1. Limpeza: remoção de resíduos orgânicos e minerais aderidos às superfícies.
5.1.2. Sanitização: eliminar microrganismos patogênicos e reduzir o número de microrganismos
5.2. higienização manual ou mecânica
5.2.1. Pré-lavagem; aplicação dos detergentes; enxágue e sanitização
5.3. Como fazer os procedimentos de higienização, enfocando as etapas de pré-lavagem, usos de detergentes, enxágue e sanitização.
5.4. Como avaliar, se fundamenta em análises microbiológicas, ou não,para definir se as condições higiênicas previamente
5.5. Preparo de solução de Álcool 70% (Solução Desinfetante).
5.5.1. Para cada 100 mL de solução, adicione 70 mL de álcool absoluto e complete o volume com água destilada.
5.6. Materiais, vidrarias e equipamentos utilizados no Laboratório de Microbiologia
5.6.1. Alça de repicagem; pipetas, placas de Petri, tubos de ensaio; autoclave, estufa de crescimento, estufa de secagem e etc.
6. Observação microscópica de bactérias, fungos e protozoários
6.1. As bactérias são organismos procariontes unicelulares.
6.2. Os fungos filamentosos, também conhecidos como bolores, são organismos eucariotos pluricelulares e heterotróficos
6.2.1. Seu crescimento vegetativo dá-se por meio de células alongadas e ramificadas denominadas hifas
6.2.1.1. Os fungos crescem bem em temperatura próxima a 25°C, são relativamente pouco sensíveis a acidez.
6.2.2. Ao crescimento emaranhado dessas células dá-se o nome de micélio, que forma o corpo fúngico.