VIRUS

1. Ácidos Nucléicos

1.1. ADN

1.1.1. ADN monocateriano (ssDNA virus)

1.1.1.1. Cadena sencilla se replica con ADN, polimerasas dependientes de ADN, no utiliza ARN

1.1.2. ADN bicatenario (dsDNA)

1.1.2.1. Cadena doble se replica con ADN pol.

1.1.3. ADN bicatenario retrotranscrito (dsDNA-RT)

1.1.3.1. Por medio de Transcripatsa inversa forma RNAm y RNA pregenómico con el ADN del virus

1.2. ARN

1.2.1. ARN monocateriano (ssRNA)

1.2.1.1. Se pueden clasificar por su carga en positivos (+) y negativos (-). El ssRNA+ no depende de DNA y asemeja RNAm. ssRNA- debe volverse en positivo por medio de RNA pol.

1.2.2. ARN bicateriano (dsRNA)

1.2.2.1. Cadena doble que utiliza RNA pol dependiente. No de la célula

1.2.3. ARN monocateriano retrotranscrito (ssRNA-RT)

1.2.3.1. A partir del RNA forma ADN con auyda de ADN pol dependiente de RNA

2. Clasificación

2.1. Se clasifican en 4 familias

2.1.1. Poxviridae

2.1.2. Herpesviridae

2.1.3. Parvoviridae

2.1.4. Paromixoviridae

3. Replicación

3.1. La replicación se realiza en el interior de una célula huésped susceptible.

3.1.1. Adsorción

3.1.1.1. Unión del anti-receptor virual, glicoproteína de envoltura (espículas) o de la cápside con el receptor celular.

3.1.2. Penetración y decapsidación

3.1.2.1. La penetración a través de la membrana plasmática de la célula puede efectuarse por los siguientes mecanismos:

3.1.2.1.1. Endocitosis mediada por receptores

3.1.2.1.2. Fusión de la membrana celular con la envoltura viral

3.1.2.2. Luego de la penetración se produce la decapsidación, es decir la pérdida de la cápside y liberación del ácido nucleico viral de la nucleocápside.

3.1.3. Síntesis de proteínas virales

3.1.3.1. En esta etapa no pueden observarse viriones en el interior de la célula, ni se recupera virus infeccioso.

3.1.3.2. Síntesis precoz de RNAm viral y de proteínas virales no estructurales necesarias para la replicación y la transcripción viral

3.1.3.3. Replicación del genoma viral

3.1.3.4. Síntesis tardía de RNAm viral y de proteínas estructurales

3.1.4. Eclipse

3.1.5. Liberación

3.1.5.1. Liberación del virus mediante lisis celular, exocitosis o gemación

3.1.5.2. Ensamblaje y formación de las partículas virales, que se puede realizar en distintas partes de la célula (núcleo, citoplasma, membrana plasmática, etc.)

3.1.5.3. Maduración de la partícula viral (partícula infectiva)

3.1.6. Latencia

3.1.6.1. Detección del virus

4. Tipos de infección viral

4.1. Localizada

4.1.1. Multiplicación viral y daño celular en la puerta de entrada

4.2. Diseminada

4.2.1. Multiplicación en ganglios linfáticos regionales

4.3. Inaparente

4.3.1. Sin sintomatología, myuy común y epidemiológicamente muy importante

5. Definiciones

5.1. Cápside

5.1.1. Cubierta proteínica o envoltura que encierra el genoma del ácido nucléico

5.2. Capsómeros

5.2.1. Unidades morfológicas sobre la superficie de las partículas virales icosaédricas

5.3. Morfogénesis

5.3.1. Proceso biológico que lleva a que un organismo desarrolle su forma

5.4. Miofilización

5.4.1. Proceso en que se congela un producto y posteriormente se introduce a una cámara de vacío para realizar la separación del agua, por sublimación

5.5. Subunidad

5.5.1. Cadena de polipéptido viral con un sólo plegamiento

5.6. Envoltura

5.6.1. Membrana que contiene lípidos y rodea algunas partículas virales, tienen una glicoproteínas expuestas sobre la superficie de la membrana, llamadas peplómeros.

5.7. Nucleocápside

5.7.1. Complejo proteína-ácido nucleico, representa la forma empacada del genoma viral, es la subestructura de una partícula viral más compleja

5.8. Unidades estructurales

5.8.1. Proteína de los elementos constitutivos básicos de la cubierta, forman un conjunto de más de una subunidad proteica no idéntica. También conocida como Protómetros

5.9. Virus defectuoso

5.9.1. Partícula viral funcionalmente deficiente en algún aspecto de la replicación

5.10. Virión

5.10.1. Partícula viral completa y sirve para transferir el ácido nucleico de una célula a otra.

6. Métodos de estudio

6.1. Métodos directos

6.1.1. Aislamiento viral - Cultivos celulares

6.1.1.1. Un cultivo celular es obtenido, de explantes de órganos o de embriones de animales.

6.1.1.1.1. Cultivos Primarios

6.1.1.1.2. Líneas Celulares Diploides

6.1.1.1.3. Líneas Celulares Continuas

6.1.1.1.4. Cuando los virus no producen efecto citopático, se puede recurrir a técnicas que ponen en evidencia la presencia de aquel en el cultivo.

6.1.2. Detección de antígenos - Técnicas Inmunológicas

6.1.2.1. INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA (ID)

6.1.2.1.1. Muestras clínicas apropiadas son recolectadas y colocadas sobre portaobjetos donde se dejan secar y fijar. Luego se agregan anticuerpos especificos marcados con isotiocianato de fluoresceína que difunden a través de la membrana celular y se combinan con los antígenos víricos en el interior de las células. La reacción antígeno anticuerpo se visualiza con el microscopio de fluorescencia, por la aparición de fluorescencia de color verde manzana.

6.1.2.2. TEST DE AGLUTINACION

6.1.2.2.1. Dependen de la fijación inicial de anticuerpos antivirales específicos sobre eritrocitos o partículas de látex. Luego este reactivo se incuba con la muestra clínica en la cual se investiga el antígeno y las partículas se aglutinan si el antígeno adecuado se encuentra presente.

6.1.2.3. RADIOINMUNOENSAYO (RIA)

6.1.2.3.1. Fue originalmente aplicado para identificar el antígeno de superficie de la Hepatitis B

6.1.2.4. ENZIMOINMUNOANALISIS (EIA)

6.1.2.4.1. Los EIA para la detección de antígeno se basan habitualmente en la captura del antígeno por anticuerpos específicos unidos a una fase sólida

6.1.3. Técnicas de Biología Molecular

6.1.3.1. SONDAS DE ACIDOS NUCLEICOS

6.1.3.1.1. Actualmente es posible extraer secuencias específicas de un fragmento de ADN por medio de las endonucleasas de restricción. Luego estas secuencias extraídas, se pueden desnaturalizar y marcar ya sea con una enzima o con un isótopo radioactivo.

6.1.3.2. SONDAS DE ACIDOS NUCLEICOS

6.1.3.2.1. Primero se trata a muestras con reactivos que solubilizan y desnaturalizan los ácidos nucleicos. Posteriormente se añade un DNA marcado, complementario del DNA del virus y se incuba en condiciones para que se produzca la hibridación. La muestra se pasa entonces por una columna que contiene un gel que separa la sonda ligada al DNA viral hibridado de la no hibridada.

6.1.3.3. AMPLIFICACION DE ACIDOS NUCLEICOS VIRALES MEDIANTE UNA REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR)

6.1.3.3.1. Es una amplificación de secuencias específicas del DNA.

6.1.4. Microscopia Electrónica

6.1.4.1. Es posible observar la morfología de los viriones presentes en muestras clínicas.

6.2. Métodos indirectos

6.2.1. INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA (IFI)

6.2.1.1. Es un método rápido y confiable para la determinación de anticuerpos antivirales en el suero del paciente.

6.2.2. ENZIMOINMUNOANALISIS INDIRECTO (EIA)

6.2.2.1. Se han aplicado de forma amplia en los últimos años al diagnóstico de anticuerpos virales.

6.2.3. TEST DE AGLUTINACION

6.2.3.1. Se busca detectar anticuerpos antivirales, por eso se usan partículas de látex recubiertas con Ag viral.

6.2.4. WESTERN BLOT (WB)

6.2.4.1. La técnica de WB se basa en la separación electroforética de proteínas virales que son posteriormente inmovilizadas en papel de nitrocelulosa con el objeto de determinar la presencia de anticuerpos específicos contra cada una de esas proteínas.

6.2.5. PRODUCCION DE ANTICUERPOS IN VITRO

6.2.5.1. Se trata de una técnica nueva que ha sido aplicada para el diagnóstico de la infección perinatal. Este procedimiento revela la presencia de anticuerpos antivirales producidos in vitro a partir de los linfocitos B extraídos de sangre total, lo que indicaría que el sistema inmune del paciente ha sido estimulado por el virus.

7. Composición química

7.1. Proteínas de la superficie

7.1.1. Proteínas de la cápsida (capsómero)

7.1.2. Proyecciones de la envoltura (peplómeros) que son glicoproteínas con actividad enzimática

7.1.3. Proteínas de la membrana de la célula huésped (restos)

7.2. Proteínas internas

7.2.1. Proteína M de la cara interna de la envoltura

7.2.2. Capsómeros de la cápsida interna

7.2.3. Proteínas asociadas al ADN (proteínas básicas tipo histonas)

7.2.4. Transcriptasas asociadas a nucleocápsidas

8. Estructura

8.1. Envoltura o cubierta

8.1.1. Los virus pueden estar desnudos o con envuelta. La envuelta esta formada por una membrana lipoproteica semejante a la membrana celular, en la que las proteínas son virus específicas y los lípidos e H de C son huésped específicos.

8.1.2. La membrana se va transformar por la presencia de glicoproteínas víricas que la van a dar unas características antigénicas especiales (virus específicas); aparte de las características antigénicas de la célula huésped.

8.2. Cápsidas

8.2.1. Simetría cubica (icosaédrica en virus animales): adenovirus

8.2.1.1. Patrón Icosaédrica

8.2.1.1.1. El icosaedro tiene 20 caras, cada una formando un triángulo equilátero, 12 vértices y ejes de 5, 3 y 2 angulaciones de simetría rotatoria.

8.2.1.2. Las cubiertas virales se componen de múltiplos de 60 unidades estructurales

8.2.1.3. Aspecto físico esférico

8.2.1.4. Algunas partes de esta forma no contienen ácido nucleico viral

8.2.1.5. Ácido nucléico: Condensado

8.2.1.6. Cápsides independientes

8.2.2. Simetría helicoidal: Mixovirus

8.2.2.1. Contienen genomas de RNA

8.2.2.2. Cápside y ácido nucleico interactúan

8.2.3. Estructuras Complejas: poxvirus

8.2.3.1. Su estructura es más compleja a las anteriores

8.2.3.2. Pueden llegar a tener forma de ladrillo

8.2.3.3. Crestas sobre la superficie externa

8.2.3.4. Corpúsculos centrales

9. Tamaño

9.1. Su tamaño es pequeño. De 20-300 nm y se puede identificar con

9.1.1. La observación directa con el microscopio electrónico

9.1.2. Sedimentación en la ultracentrífuga

9.1.3. Mediciones comparativas

10. Reacciones a agentes físico-químicos

10.1. Calor y frío

10.1.1. Gran variedad de termovariailidad

10.1.1.1. Infecciocidad de los virus se destruye por calentamiento a 50 o 60° por 30 min. Excepciones: Virus de la Hepatitis B

10.2. Estabilidad por sales

10.2.1. Pueden ser in-estabilizados por concentraciones de 1 mol/lt de sales. Son inactivos a T° de 50°C durante 1 hora.

10.3. pH

10.3.1. Estables: 5.0 y 9.0. Algunos resistentes a condiciones ácidas se destruyen en condiciones alcalinas

10.4. Radiaciones

10.4.1. Rayos UV, Rayos X y Partículas de alta energía inactivan a los virus saturando su ac. nucléico

10.5. Sensibilidad al éter -Cloro -Formo

10.5.1. Distingue a los que tienen envoltura rica en lípidos de los que no

10.5.1.1. Resistentes

10.5.1.1.1. Ej: Herpes virus, Paramixovirus, Retrovirus

10.5.1.2. Inactivación

10.5.1.2.1. Ej: Papovavirus, Adenovirus, Parvovirus

10.6. Detergentes

10.6.1. No iónicos

10.6.1.1. Solubilizan a los constituyentes lipídicos de las membranas virales

10.6.2. Aniónicos

10.6.2.1. Solubilizan a los constituyentes lípdicos de las membranas virales y desintegran la cápside.

10.7. Formaldehído

10.7.1. Destruye la infección viral al reaccionar con el ácido nucléico

10.8. Antibióticos

10.8.1. Carecen de efecto en los virus

11. Glúcidos y lípidos

11.1. Poxvirus

11.1.1. parte de los lípidos son virus específicos.

11.2. Mixovirus

11.2.1. los glúcidos de las glicoproteínas de la envuelta son virus específicos.

12. Interacciones virus-huésped

12.1. Infección latente

12.1.1. Se detecta al virus en recaidas

12.1.2. Existe respuesta inmune pero no protege de recaidas

12.2. Infección crónica

12.2.1. El virus se detecta de forma continúa, con síntomas o sin ellos

12.3. Infección lenta

12.3.1. Periodo de incubación muy largo y el virus se está multiplicando