Crio-microscopía

1. Definición

1.1. Técnica óptima

1.1.1. Observar estructuras moleculares

1.1.2. Visualización en 3D

1.2. Utiliza microscopios de transmisión electrónica

1.2.1. Escala molecular

1.2.2. Resolución atómica

2. Aportes

2.1. Criocongelación casi inmediata

2.1.1. No produce reacciones química adversas

2.2. Reemplaza la cristalografía de rayos X

2.2.1. Para desentrañar estructuras de macromoléculas

2.3. Disminuye el daño de la muestra en la etapa de preapración

3. Surgimiento

3.1. Los electrones tienen una longitud de onda que dependen de la energía

3.1.1. Mucha energía daña la muestra

3.1.2. Trabaja altísimo vacio

3.2. "Vitrificación"

3.2.1. Enfriamiento rápido

3.2.2. Bajas temperatura (-185°;-195°)

3.2.3. Misma situación que en la solución acuosa

4. Proceso

4.1. Preparación de la muestra

4.1.1. Se tiene una muestra de proteína purificada

4.1.2. Se deposita la muestra en una rejilla especial (de carbono amorfo)

4.1.3. Se sumerge en un criógeno para que la muestra se ultracongele

4.2. Análisis de imágenes

4.2.1. Se recogen datos con el microscopios electrónico

4.2.2. Se alinean las imágenes

4.2.3. Se promedian los datos

4.2.4. Se traza un mapa 3D preliminar