1. Pared celular posee una capa fina de peptidoglucano en adición a una capa lipopolisacárida externa
2. ¿Qué son las tinciones?
2.1. Aplicación de colorantes orgánicos cargados (+) como: cristal violeta de genciana
3. Enterobacteriaceae
3.1. Clasificación
3.1.1. De acuerdo a su capacidad patógena
3.1.2. De acuerdo a su capacidad de fermentar lactosa: se utiliza agar Mac-Conkey y Hektoen para poder observar la fermentación de lactosa
3.2. Factores de virulencia
3.2.1. Factores de virulencia • Cápsula • Fimbrias de adherencia • Lipopolisacaridos • Hemolisinas (algunas cepas) • Resistencia a antibacterianos • Enterotoxinas: relacionadas con las cepas enteropatógenas
3.3. Patógenas
3.3.1. • Escherichia coli (cepas patógenas) • Salmonella spp • Shiguella spp. • Yersinia spp.
3.3.1.1. Ejemplos:
3.3.1.1.1. Cepas enteropatógenas de E. coli Se les llama también cepas diarreogénicas: - ECEP: Escherichia coli entero patógena - ECET: Escherichia coli entero toxigénica - ECEA: Escherichia coli entero agregativa - ECEH: Escherichia coli entero hemorrágica - ECEI: Escherichia coli entero invasiva
3.3.2. Estrictamente patógenas, no se encuentran en la flora normal.
3.4. Oportunistas
3.4.1. • Escherichia coli (cepas no patógenas) • Klebsiella spp • Proteus spp • Enterobacter spp • Citrobacter spp • Serratia spp
3.4.1.1. Ejemplos:
3.4.1.1.1. - K. pneumoniae - K. granulomatis
3.4.2. Enterobacterias que no deberían estar causando infección pero que cada vez se encuentran más que causan infecciones oportunistas
4. Explicación en tinción de bacterias Gram + y -
5. Gram +
6. Pared celular posee una capa gruesa de peptidoglucano
7. Tinción con violeta de genciana queda retenida en la pared por lo que sus células se mantienen azules
7.1. Ya que el tiempo que la muestra es expuesta al alcohol cetona no es suficiente para decolorarla completamente.
8. Ejemplos: Staphylococcus aureus Streptococcus pyrogenes Streptococcus aglactiae. Streptococcus faecalis. Streptococcus pneumoniae Streptococcus sanguis. Clostridium tetani. Bacillus antracis Clostridium botullinum Clostridium perfringes.
9. Tinción Diferencial: Esta tinción ayuda a diferenciar entre gram (+) y (-)
9.1. Pasos: 1) Con una asa microbiológica recuperar colonias de bacterias del medio sólido.
9.1.1. NOTA: La asa microbiológica se emplea para transportar, arrastrar, trasvasar inóculos (pequeño volumen que contiene microorganismos en suspensión) desde la solución de trabajo también llamada “solución madre” al medio de cultivo (sólido o líquido)
9.2. Paso 2) Formar una capa fina en un portaobjetos
9.2.1. NOTA: de esta manera se podrá observar mejor, de manera espaciada los microorgansimos.
9.3. Paso 3) Secar la muestra acercándola a la llama del mechero bunsen
9.3.1. NOTA: No recalentar demasiado la muestra, para no dañar las estructuras.
9.4. Paso 4) Pasar por el mechero tres o cuatro veces la muestra para fijar la muestra y dejar enfriar
9.4.1. NOTA: Así al agregar los colorantes orgánicos la muestra no se despegará.
9.5. Paso 5: Cubrir la mezcla con violeta de genciana
9.5.1. NOTA: Durante un minuto.
9.6. Paso 6: Escurrir el colorante y agregar lugol
9.6.1. NOTA: el lugol actua como mordiente, que fija mejor los pigmentos. Dejar el lugol por 1 minuto y luego enjuagar con agua.
9.7. Paso 7: Decolorar la muestra con alcohol cetona
9.7.1. NOTA: durante 15 segundos