1. Tipos de siembra
1.1. Métodos de siembra
1.1.1. Siembra en medio sólido
1.1.1.1. Estría simple
1.1.1.2. Estría cruzada por extensión
1.1.2. Siembra en medio semisólido
1.1.2.1. Por punción
1.1.3. Siembra en medio líquido
1.1.3.1. Por agitación o dilución
1.2. Cultivos de referencia
1.2.1. Cultivos Tipo de la SSA, ENCB o IMSS
2. Procedimientos
2.1. Cálculos para realización de medios de cultivo
2.1.1. En placa
2.1.1.1. # Placas X ml del medio = Vol de medio Determinar gramos requeridos Regla de 3 Gr de envase ------------- 1000 ml X -------------- Vol medio prep.
2.1.2. En tubo
2.1.2.1. # Tubos X 3 ml medio = Vol de medio Determinar gramos requeridos Regla de 3 Gr de envase ------------- 1000 ml X -------------- Vol a preparar
2.2. Manejo de instrumentos
2.2.1. Potenciómetro
2.2.1.1. Instrumento que mide la actividad del ion H en soluciones acuosas, indicando su grado de acidez o alcalinidad expresada como pH.
2.2.1.2. Tipos de potenciómetro
2.2.1.2.1. De sobremesa
2.2.1.2.2. Para carnes o superficies duras
2.2.1.2.3. De bolsillo
2.2.2. Espectrofotómetro
2.2.2.1. Equipo empleado para el análisis de compuestos químicos que mide la cantidad de luz absorbida
2.2.2.2. Funciones
2.2.2.2.1. Brinda información sobre la naturaleza de la sustancia
2.2.2.2.2. Cuantifica la sustancia que nos interesa y que está presente en la muestra
2.2.2.2.3. Absorbancia UV-Vis = 200 a 850 nm
2.2.3. Balanza
2.2.3.1. Instrumento que mide la masa de un cuerpo o sustancia
2.2.3.2. Clasificación
2.2.3.2.1. Sensibilidad
2.2.3.2.2. Construcción
3. Preparación de medios de cultivo
3.1. Definición
3.1.1. material nutritivo donde se pueden recuperar, multiplicar y aislar los MO y efectuar pruebas de susceptibilidad.
3.2. Recomendaciones generales
3.2.1. * pH ajustado * contener nutrientes adecuados * poseer humedad determinada * condiciones asépticas del medio y materiales estériles
3.3. Clasificación
3.3.1. Aspecto físico
3.3.1.1. Líquidos
3.3.1.1.1. - Para cultivar MO y obtener grandes cantidades de los mismos
3.3.1.1.2. - Estimular y promover la selección de algún o algunos MO
3.3.1.1.3. - Identificar al MO mediante pruebas bioquímicas.
3.3.1.2. Semisólidos
3.3.1.2.1. - Para identificaciones bioquímicas
3.3.1.3. Sólidos
3.3.1.3.1. - Para obtener colonias aisladas de MO
3.3.2. Uso
3.3.2.1. Selectivos
3.3.2.2. De enriquecimiento
3.3.2.3. Diferenciales
3.3.2.4. Para cultivo de germenes anaerobios
3.3.2.5. Para medir potencial de antibióticos
3.3.2.6. Transporte
3.3.2.7. Filtración a través de membrana
3.3.2.8. Especiales para hongos y levaduras
3.3.2.9. Especiales para cultivo de protozooarios
3.4. Precauciones
3.4.1. Laboratorios microbiológicos y equipos deben ser de dedicación exclusiva
3.4.2. Debe haber espacio suficiente para las actividades
3.4.3. Evitar confusiones, contaminación y contaminación cruzada.
3.4.4. Suministros de aire independientes
3.4.5. Adecuada limpieza y desinfección
3.5. NOM-065-SSA1-1993
3.5.1. Objetivo
3.5.1.1. Determinar las especificaciones mínimas que deben tener los medios de cultivo.
3.5.2. Campo de aplicación
3.5.2.1. Es para todas las industrias, laboratorios y establecimientos dedicados al proceso de estos productos en el territorio nacional
3.5.3. Especificaciones
3.5.3.1. Humedad
3.5.3.2. Composición del medio
3.5.3.3. Método preparación
3.5.3.4. Condiciones de presión y T°
3.5.3.5. Advertencia: no esterilizar el medio
3.5.3.6. Características de desarrollo MO
3.5.3.7. Advertencia de conservación
3.5.3.8. Resultados pruebas de estabilidad y viablidad
3.5.3.9. pH preparado
3.5.3.10. Fuerza en gel
3.5.4. Etiquetado
3.5.4.1. Nombre comercial
3.5.4.2. Uso
3.5.4.3. Leyenda "Agente de diagnóstico"
3.5.4.4. Presentación
3.5.4.5. Datos de conservación y almacenaje
3.5.4.6. Caducidad
3.5.4.7. N° Lote
3.5.4.8. N° Registro SSA
3.5.4.9. Nombre y dirección fabricante
3.5.4.10. Nombre y dirección distribuidor
3.5.4.11. Método de preparación y pH final
3.5.4.12. Formula
4. Control de calidad de los medios de cultivo
4.1. Pruebas de esterilidad
4.1.1. Físicos
4.1.1.1. Medidores de presión
4.1.1.2. Termómetros
4.1.1.3. Termógrafos
4.1.2. Químicos
4.1.2.1. Cintas testigo
4.1.3. Biológicos
4.1.3.1. Preparaciones especificas de esporas, resistentes al proceso de esterilización. Incubar por 24 hrs.
4.2. Cepas de referencia
4.2.1. Cultivos tipo de MO de la ATCC u otra cepas certificadas.
4.2.1.1. *Centros de Referencia de Cultivos Tipo de la SSA, ENCB o IMSS
4.3. Almacenamiento
4.3.1. Se debe etiquetar con la fecha en que se esterilizo y el tipo de material que es.