PRUEBAS DE LA HEMOSTASIA SECUNDARIA

1. TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADA APTT

1.1. Condiciones del paciente

1.1.1. El paciente no requiere ninguna preparación especial.

1.2. Controles de la fase preanalítica

1.2.1. Materiales

1.2.1.1. Orden médica -Tubos de hemólisis - Pipetas y micropipetas - Baño de agua a 37°C - Cronómetro - Fuente luminosa para observación del coágulo.

1.2.2. Toma De La Muestra

1.2.2.1. -Plasma: Obtener sangre cuidadosamente (evitando estasis o trauma) y colocar en un tubo con anticoagulante en proporción9 + 1exacta (ejemplo: 4,5 ml de sangre + 0,5 ml de Anticoagulante TP de Wiener lab.). Mezclar suavemente. Centrifugar y separar el plasma antes de los 30 minutos. Es recomendable efectuar la extracción con jeringas plásticas

1.3. Significado clínico

1.3.1. Detectar anormalidades

1.3.1.1. Factores VIII, IX, XI y XII.

1.3.2. Detecta deficiencias severas

1.3.2.1. Factores II, IV, X y Fibrinógeno.

1.4. Fundamentos del método

1.4.1. Se basa en la medida del tiempo que tarda en coagular un plasma descalcificado, colocando en un baño a 37°C y en presencia de un exceso de cefalina, activador y calcio.

1.5. Interpretación de resultados

1.5.1. Los resultados pueden expresarse de distinta forma.

1.5.1.1. Como tiempo de tromboplastina parcial activada en segundos.

1.5.1.2. Como relación entre el tiempo obtenido con el desconocido y el de un plasma control.

1.6. Valores de referencia

1.6.1. Técnica manual

1.6.1.1. Su valor normal es de 24-35 segundos.

1.6.2. Cada laboratorio debe establecer sus propios valores de referencia a partir de las técnicas e instrumental empleado, ya que los valores de personas sanas varían en función del laboratorio, dependiendo de la técnica empleada.

2. TIEMPO DE TROMBINA

2.1. Condiciones del paciente

2.1.1. El paciente no requiere ninguna preparación especial.

2.2. Controles de la fase preanalítica

2.2.1. Materiales

2.2.1.1. Orden médica - Tubos de hemólisis - Micropipetas - Baño de agua a37°C - Cronómetro - Fuente luminosa para la observación del coágulo.

2.2.2. Toma De La Muestra

2.2.2.1. Plasma: Obtener sangre cuidadosamente, evitando estasis o espuma y colocarla en un tubo con anticoagulante en proporción 9+1 exacta. Mezclar suavemente. Centrifugar y separar el plasma antes de los 30 minutos.

2.3. Significado clínico

2.3.1. El tiempo de trombina evalúala conversión del fibrinógeno a fibrina. Por lo tanto, la anomalía en el nivel funcional del fibrinógeno, la presencia desustancias que interfieran en la acción de la trombina sobre el fibrinógeno (heparina, hirudina) olas que bloquean la polimerización de los monómeros de fibrina conducen a un prolongamiento del test Tiempo de Trombina.

2.3.2. La alteración del test de Tiempo de Trombina puede deberse a: desórdenes cualitativos o cuantitativos del fibrinógeno, actividad fibrinolítica aumentada, terapias con anticoagulante, terapias fibrinolíticas, etc.

2.4. Fundamentos del método

2.4.1. Se basa en la medida del tiempo que tarda en coagular un plasma descalcificado, colocado a37°C y en presencia de una solución de trombina de actividad fija.

2.5. Valores de referencia

2.5.1. Método Manual

2.5.1.1. 13 - 17 seg para 4.0 UNIH/ml 17 - 21 seg para 2.7 UNIH/ml

2.5.2. Estos valores son sólo orientativos, dado que el tiempo de coagulación es influido por variables, como la toma y conservación de la muestra, la metodología e instrumental empleado, etc. Por lo tanto, cada laboratorio debe establecer sus propios intervalos de referencia dentro de su población de pacientes.

2.6. Interpretación de resultados

2.6.1. Los resultados se expresan en segundos. Si la diferencia entre los replicados de una misma muestra es mayor del 5%, se aconseja repetir el procedimiento desechando los valores anteriores.

3. RECUENTO PLAQUETARIO

3.1. Condiciones del paciente

3.1.1. El paciente no requiere preparación previa para esta prueba.

3.2. Controles de la fase preanalítica

3.2.1. Materiales

3.2.1.1. -Orden médica -Tubocon anticoagulante EDTA -Guantes-Bata -Algodón -Alcohol -Equipo de venopunción

3.2.2. Toma de la Muestra

3.2.2.1. -Evitar tomar de sitios devía de heparina (en casode tomar la muestra deestas vías, se debe descartar los primeros 5 mL de sangre)

3.2.3. Transporte de la Muestra

3.2.3.1. Se debe transportar a temperatura ambiente lo antes posible -Procesar la muestra antes de 4 horas

3.2.4. Evaluación de la muestra macroscópicamente

3.2.4.1. Deberá tener una inspección de coágulos, puesto que estos interfieren con la realización del conteo de ser por método automático. - Una inspección visual de posible hemorragia o lipemia, ya que interfieren puesto que en caso de hemorragia los factores de la coagulación puede activarse y producir coágulos, en el caso de la lipemia presentará disminución de leucocitos y hemoglobina.

3.3. Significado clínico

3.3.1. Niveles Aumentados

3.3.1.1. -Neoplasia -Policitemia vera -Síndrome postesplenectomía -Artritis reumatoide -Anemia por deficiencia de hierro

3.3.2. Niveles disminuidos

3.3.2.1. -HiperesplenismoHemorragia -Trombocitopenia inmunitaria-Leucemia y otrostrastornos neurofibróticos-Trombocitopenia trombótica -Trastornostrombocitopénicos -Coagulación-Lupus intravascular diseminada eritematoso sistémico -Anemia perniciosa -Anemiahemo quimioterapialítica para tratamientodel cáncer -Infecciones

3.4. Fundamentos del método

3.4.1. Método Manual

3.4.1.1. El recuento plaquetario en sangre entera refleja, en pacientes normales, el equilibrio que existe entre la producción en médula ósea y las plaquetas en circulación periférica. Donde el personal de laboratorio por medio de un lamina previamente coloreada y en el objetivo de 100x al microscopio, deberá ir contando cada una de las plaquetas vistas en 10 campos, para luego realizar el promedio y ser multiplicado por una constante para así obtener el resultado de plaquetas por mm3 de sangre.

3.4.2. Método automático

3.4.2.1. Se emplean contadores multiparámetros, dondeel recuento plaquetario es parte del perfil celular sanguíneo. Se utiliza sangre con EDTA. Existencontadores que utilizan la metodología apertura-impedancia con elsiguiente fundamento: la célula, al pasar a través de un orificio en el quehay una diferencia de potencial conocida, induce un pulso eléctrico que esdirectamente proporcional al volumen celular. Para esto lamuestra es diluida, automáticamente, con unasolución de conductividad fija, es conducida,unidireccionalmente, a través de una apertura u orificio de tamaño determinado. Una corriente eléctricaconstante pasa entre electrodos ubicados a cadalado de la apertura determinando una zona de censado a lo largo de toda la apertura.

3.4.2.1.1. Qué sucede en el ciclo?

3.5. Interpretación de resultados

3.5.1. Los valores inferiores 100.000/mm3son indicativos de trombocitopenia. Un recuento mayor a 450.000/mm3significa trombosis.

3.6. Valores de referencia

3.6.1. Adultos 150.000-450.000/mm3.

3.6.2. Recién nacidos:150.000- 300.000/mm3

3.6.3. Niños pequeños:200.000-475.000/mm3

3.6.4. Niños: 150.000-400.000/mm3

3.6.5. Niños prematuros: 100.000-300.000/mm3

4. TIEMPO DE SANGRÍA

4.1. Condiciones del paciente

4.1.1. Pacientes con recuento de plaquetas inferior a 50.000 practicar la prueba. Pacientes que estén recibiendo tratamiento a base de ácido acetil salicílico deben esperar mínimo de 7 a 9 días de ser suspendido el medicamento para poderle realizarle la prueba

4.2. Controles de la fase preanalítica

4.2.1. Materiales

4.2.1.1. Orden médica -Lanceta original de Frank -Esfigmomanómetro a una presión constante de 40mmHg, -Guantes -Cronómetro, -Papel de filtro -Bisturí -Bata -Algodón -Alcohol

4.2.2. Toma de la muestra

4.2.2.1. En el antebrazo donde va el esfigmomanómetro ó en el lóbulo de la oreja

4.3. Significado clínico

4.3.1. Tiempo prolongado

4.3.1.1. El tiempo de sangrado se prolonga cuando disminuyenlas plaquetas cuando éstas son anormales, como sucede en latrombocitopenia, en el síndrome de disfunción plaquetaria, Reducción o anormalidad de los factores plasmáticos, como factor de von Willebrand y fibrinógeno. En las anormalidades en la pared de los vasos pequeños, vasiculopatía. En la diátesis hemorrágicas de tipo trombopático,entre las causas más frecuentes es la enfermedad de Werlhoff, caracterizada, además, por una cifra baja de plaquetas, un tiempo de coagulación normal, prueba de lazo positiva y menor retracción del coágulo.

4.3.1.1.1. ¿Qué otras?

4.3.1.1.2. New node

4.4. Fundamentos del método

4.4.1. Cuando se produce lesión tisular quedan expuestos los componentes del subendotelio (fundamentalmente colágeno tipo IV y V) donde las plaquetas se adhieren y luego se agregan. El tiempo de sangría se basa en esta propiedad y mide el tiempo que tarda en cohibirse la salida de sangre provocada por una incisión estandarizada realizada en los vasos superficiales pequeños. Es una prueba global de la hemostasia primaria. Está influenciada por factores técnicos que se deben estandarizar cuidadosamente: profundidad, ubicación y dirección de la incisión; también depende del tipo de piel del paciente y la habilidad del laboratorista. El TS depende fundamentalmente de la calidad y cantidad plaquetaria.

4.4.1.1. Tipos de técnicas

4.4.1.1.1. Técnica de Duke

4.4.1.1.2. Técnica de Ivy

4.5. Interpretación de resultados

4.5.1. Valores por encima de lo normal se considera patológicos

4.6. Valores de referencia

4.6.1. Técnica de Duke

4.6.1.1. Valor normal de hasta 5 minutos

4.6.2. Técnica de Ivy

4.6.2.1. Valores normales de 2 a 8 minutos

5. TIEMPO DE PROTROMBINA TP

5.1. Condiciones del paciente

5.1.1. Debe preguntar al médico si el tipo de medicamento (anticoagulante) que está tomando, si interfiere en la prueba, -Debe estar en ayunas -En lo posible con camisas o blusas de manga corta

5.2. Controles de la fase preanalítica

5.2.1. Materiales

5.2.1.1. -Orden médica -Tubo con anticoagulante Citrato sódico -Guantes-Bata -Algodón -Alcohol -Equipo de venopunción

5.2.2. Toma de la muestra

5.2.2.1. -Evitar tomar de sitios devía de heparina (en casode tomar la muestra deestas vías, se debe descartar los primeros 5 mL de sangre)

5.2.3. Transporte de la muestra

5.2.3.1. Debe ser a temperatura ambiente y procesada antes de las 4 horas después de la extracción

5.3. Significado clínico

5.3.1. Tiempo prolongado

5.3.1.1. Son encontrados en diferentes enfermedades como; -Deficiencia congénita y adquirida de uno o varios de los factores FVII, FX, FV, FII e hipofibrinogenemia o hipodisfibrinogenemias severas. -Enfermedad hepática - Deficiencia de vitamina K - Tratamiento con anticoagulantes orales anti vitamina K - Tratamiento con anticoagulantes orales directos, antitrombínicos (dabigatrán) y anti Xa (rivaroxabán > edoxabán > apixabán) - Presencia de inhibidores específicos dirigidos contra factor VII, X, V ó II.

5.4. Fundamentos del método

5.4.1. Evalúa la vía extrínseca y común del sistema de coagulación. La prueba consiste en medir el tiempo de coagulación de un plasma citratado en presencia de tromboplastina (mezcla de factor tisular con fosfolípidos) e iones calcio. El TP refleja cambios en los niveles de tres factores vitamina K-dependientes (FII, FVII, FX) y del FV.

5.5. Interpretación de sus resultados

5.5.1. Un número superior al valor normal significa que la sangre demora más tiempo en coagularse, posible enfermedad o trastorno. Un número inferior al valor normal significa que la sangre se coagula más rápido de lo normal, No representa un problema grave.

5.6. Valores de referencia

5.6.1. El tiempo promedio para que la sangre se coagule oscila entre 10 y 14 segundos.