Practica 1.Preparación y esterilización de materiales y medios de cultivo.

1. 1. Procedimiento de preparación de material y medios de cultivos.

1.1. Preparación de Medios de Cultivo

1.1.1. Lavar y enjuagar el material de vidrio.

1.1.2. Enjuagar con agua destilada y escurrir.

1.1.3. Agar Nutritivo (AN): 160 mL en matraz Erlenmeyer de 250 mL (calentar hasta ebullición).

1.1.4. Agar Papa Dextrosa (PDA): 270 mL en matraz Erlenmeyer de 500 mL (agitación magnética y calentado).

1.1.5. Medio EMB: 140 mL en matraz Erlenmeyer de 250 mL (calentar con agitación magnética).

1.2. Demostración del profesor

1.2.1. Elaboración de tapones y capuchones para matraces.

2. Introducción

2.1. Definición de Medio de Cultivo

2.1.1. Solución nutritiva usada para cultivar microorganismos en el laboratorio.

2.2. Importancia de la Preparación y Esterilización

2.2.1. La selección y preparación adecuadas son cruciales para evitar contaminación y garantizar el éxito del cultivo.

2.2.2. La esterilización implica la eliminación completa de organismos.

2.3. Métodos de Esterilización (Cuadro 1)

2.3.1. Fisicos

2.3.1.1. Calor (seco y húmedo). Radiación. Filtración.

2.3.2. Químicos

2.3.2.1. Agentes antimicrobianos para inhibir o eliminar microorganismos.

2.4. Esterilización por Calor en Microbiología

2.4.1. Calor seco

2.4.1.1. Destrucción por oxidación (usas de inoculación, material de vidrio).

2.4.2. Calor húmedo (autoclave)

2.4.2.1. Vapor a 121°C y 15 lb/in² durante 15-20 minutos, inactivación de endosporas.

3. 2. Esterilización de Medios de Cultivo

3.1. Preparación del Autoclave

3.1.1. Revisar que el agua esté limpia y nivelada.

3.1.2. Colocar medios y materiales en la canastilla del autoclave.

3.2. Proceso de Esterilización

3.2.1. Alcanzar 121°C o 15 Ib/in de presión durante 15 minutos.

3.2.2. Apagar, esperar a que la presión baje a cero, y retirar materiales con guantes de asbesto.

4. 6. Discusión

4.1. Efectividad de Esterilización y Manejo de Materiales

4.1.1. Evaluar si los procesos fueron efectivos o no.

4.1.2. Justificación basada en bibliografía.

4.2. Diferencias en Crecimiento por Medio de Cultivo

4.2.1. Análisis de tipos de microorganismos observados en cada medio.

4.2.2. Discusión basada en bibliografía.

5. EQUIPO:

5.1. Tapia Zepeta Dayna Alexa

5.2. Cedillo Alcantara Bruno

5.3. Rosas Hernandez Paulina

5.4. Ramos Garcia Ian Yael

5.5. Fernández Olvera Dafne Itzel

6. 5. Resultados

6.1. Informe Cualitativo de crecimiento Microbiano

6.1.1. Cuadro 1

6.1.1.1. (-): Ausencia de crecimiento.

6.1.1.2. (+): Crecimiento regular.

6.1.1.3. (++): Crecimiento abundante.

6.1.2. Descripción de Morfología de Colonias

6.1.2.1. Forma, color, apariencia, y características visibles.

7. 3. Vertido y Solidificación de Medios en Cajas Petri

7.1. Preparación del Área Aséptica

7.1.1. Limpiar con solución de etanol al 70% y encender mecheros a 50 cm de distancia.

7.2. Vertido en Cajas Petri

7.2.1. Enfriar medios a 45-50°C.

7.2.2. Verter 25 mL en cada caja Petri (2 de AN, 2 de EMB, 2 de PDA).

7.3. Solidificación y Almacenamiento

7.3.1. Dejar enfriar y solidificar. Guardar el resto en refrigeración.

8. 4. Prueba de Esterilidad de Materiales

8.1. Condiciones de Esterilidad

8.1.1. Abrir una caja Petri de cada medio en zona aséptica y etiquetar.

8.1.2. Abrir una caja Petri en zona no aséptica y etiquetar.

8.2. Incubación y Observación

8.2.1. Colocar a 30°C por 24-48 horas.

8.2.2. Revisar formación de colonias microbianas.