AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DEL MATERIAL GENÉTICO PROCARIOTA

1. Técnicas usadas para identificar, amplificar y copiar genes

2. AMPLIFICACIÓN DE FRAGMENTOS DE ÁCIDO NUCLEICO POR REACCIÓN EN LA CADENA DE LA POLIMERASA

2.1. Se usa para amplificar regiones del ADN, para un análisis adicional, y su producto es la clonación de un gen.

2.1.1. PCR

3. LA HIBRIDACIÓN, TRANSFERENCIA DE SOUTHERN Y TRANSFERENCIA NORTHERN

3.1. Cuando el ADN se transfiere a una membrana de nylon, la técnica se llama transferencia de Southern.; cuando el ARN se transfiere a una membrana de nylon, se llama transferencia de Northern.

3.1.1. Northern

4. AISLAMIENTO DE ADN PLASMIDÍCO

4.1. La exposición de suspensiones bacterianas a detergentes aniónicos fuertes en valores de pH altos desestabiliza la envoltura celular, desnaturaliza el ADN cromosomal y las proteínas, y libera el ADN plasmídico al sobrenadante.

4.1.1. ADN Plasmidíco

5. EXTRACCIÓN DE ADN Y ARN

5.1. El primer paso es la extracción de la célula usando técnicas y reacciones enzimáticas, para el rompimiento de la misma = "LISIS"

5.1.1. Las enzimas que inactiva a las macromoléculas son proteasasy ribonuclesas.

5.1.1.1. Extracción de ADN

5.2. El ARN se utiliza para estudiar la expresión genética de los patrones en las células.

5.2.1. La extracción del ARN, al igual que la del ADN, requiere enzimas que inactiva macromoléculas

5.2.1.1. Extracción de ARN

6. ELECTROFORESIS EN GEL

6.1. Se utiliza para separar molécula con base al tamaño y en la carga de éste, y el producto puede ser un cromosoma o un fragmento.

6.1.1. Al aplicar corriente eléctrica controlada, se separan biomoléculas a través de una matriz gelatinosa

6.1.1.1. Electrolforesis en Gel