1. Osteoblastos
1.1. Localización
1.1.1. Superficie del hueso
1.2. Abundancia
1.2.1. 5% de las células del hueso
1.3. Función
1.3.1. Secretar matriz ósea
1.3.1.1. Colágeno (90% de la proteína del hueso)
1.3.2. Calcificación de la matriz ósea
1.3.2.1. Secretando
1.3.2.1.1. Osteocalcina
1.3.2.1.2. Vesículas de matriz
1.3.2.2. Provocando
1.3.2.2.1. Deposición de cristales de hidroxiapatita Ca10(PO4)6(OH)2
1.4. Vida
1.4.1. 12 días
2. Osteocitos
2.1. Origen
2.1.1. Osteoblastos que han quedado atrapados en la matriz ósea
2.2. ¿Qué son?
2.2.1. Células ovales pequeñas con procesos celulares largos
2.3. Localización
2.3.1. Interior del hueso
2.4. Abundancia
2.4.1. 95% de las células del hueso son osteocitos
2.5. Características
2.5.1. Se conectan entre ellos a través de uniones comunicantes
2.6. Función
2.6.1. Mantener la matriz ósea
2.6.2. Sensar el estrés mecánico
2.6.3. Regular la homeostasis de Calcio y Fosfato
2.7. Vida
2.7.1. Entre 10 y 20 años
3. Osteoclastos
3.1. ¿Qué son?
3.1.1. Células multinucleadas grandes
3.2. Localización
3.2.1. Superficie del hueso
3.3. Abundancia
3.3.1. Menos del 1% de las células del hueso
3.4. Función
3.4.1. Degradar la matriz ósea y reabsorber el hueso
3.4.1.1. A través de la hidrólisis enzimática de la matriz ósea mineralizada
3.5. Activación
3.5.1. Se polarizan, generando
3.5.1.1. Un borde rugoso
3.5.1.2. Una zona de sellado
3.5.1.2.1. Compuesta de un anillo de actina e integrinas unido a la matriz ósea
3.5.1.2.2. Aísla la zona de resorción
3.6. Vida
3.6.1. 3 días
3.7. Fisiología
3.7.1. Cómo se comen el hueso?
3.7.1.1. Dos mecanismos
3.7.1.1.1. 1
3.7.1.1.2. 2
4. Microscopía de fluorescencia
4.1. Moléculas fluorescentes
4.1.1. Fluoróforo
4.1.1.1. Se excitan mediante la absorción de un fotón
4.1.1.2. Vuelven a su estado basan mediante la emisión de un fotón a una mayor longitud de onda
4.1.1.3. Le entrego luz verde y me devuelve luz roja
4.1.1.4. Ejemplo
4.1.1.4.1. GFP
4.1.2. Podemos introducir el gen de una proteína fluorescente dentro de otra proteína
4.2. Microscopio de fluorescencia
4.2.1. Componentes
4.2.1.1. Primer filtro de barrera
4.2.1.1.1. Deja pasar solo la luz con una cierta longitud de onda
4.2.1.2. Espejo dicroico
4.2.1.2.1. Refleja luz de una determinada longitud de onda y transmite la luz de las otras longitudes de onda
4.2.1.3. Segundo filtro de barrera
4.2.1.3.1. Excluye las señales fluorescentes no deseadas
4.2.1.3.2. Se coloca un segundo filtro cerca del ocular porque los fluoroforos emiten un rango de longitudes de onda, no una sola
4.2.2. Microscopia de reflexión total interna
4.3. Tipos
4.3.1. Epifluorescencia
4.3.1.1. Captura la fluorescencia proveniente del volumen de emisión completo de la muestra.
4.3.1.1.1. Se ilumina toda la célula y se ven los fluoroforos de toda la célula
4.3.2. Confocal
4.3.2.1. Luz emitida por moléculas fluorescentes se pasa a través de un pinhole
4.3.2.2. Remueve la luz fuera de foco
4.3.2.3. Observación precisa
4.3.2.3.1. Adquisición secuencial de imagenes x-y a lo largo del eje z
4.3.2.3.2. Puede enfocar zonas muy pequeñas, hasta de 1 micrómetro
4.3.3. Fluorescencia de reflexión total interna (TIRF)
4.3.3.1. Onda evanescente
4.3.3.1.1. Generada cuando el haz es completamente reflejado por el cubreobjeto
4.3.3.2. Excita moléculas fluorescentes en una delgada capa de 100 nm desde el cubreobjetos
4.3.3.3. Permite observar proteínas de membrana (los primeros 100 nanómetros de la célula)
4.3.3.4. Cuando se hace incidir un láser en una interfase entre dos compuestos que tienen distintos coeficientes de absorción
4.3.3.4.1. Se colocan las células sobre un vidrio
4.3.3.4.2. Indicio de de refracción de la célula distinto al del vidrio
4.3.4. Microscopia de dos fotones
4.3.4.1. Entrega dos pulsos de luz de menor energía
4.3.4.1.1. Problema
4.3.4.1.2. Dos fotones de la mitad de la longitud de onda de excitacion se combinan y la absorción simultánea es suficiente para excitar al fluoróforo
5. Microscopia intravital
5.1. Microscopio comun y corriente
5.2. Objetivo
5.2.1. Animal completo
5.2.1.1. Anestesia
5.2.1.2. Control ambiental
5.2.1.3. Monitoreo cardiovascular y respiratorio
6. Ciclo de remodelamiento óseo
6.1. a. Microdaño o estrés mecánico
6.1.1. Es sensado por osteocitos
6.1.1.1. 1. Reclutamiento de células precursoras de osteoclastos a la zona del daño
6.1.2. 2. Proliferación de las células precursoras de osteoclastos
6.1.3. 3. Diferenciación de las células precursoras de osteoclastos en osteoclastos maduros
6.1.4. 4. Activación de los osteoclastos
6.2. b. Resorción de ósea osteoclástica
6.3. c, Inversión
6.3.1. Una vez que osteoclastos degradan el hueso se suicidan
6.3.2. Se llama así porque pasa de degradarse a formarse el hueso
6.4. d. Formación ósea osteoblástica
6.4.1. 1. Quimiotaxis
6.4.1.1. Se llama a las células precursoras de osteoblastos para que se muevan a la zona donde se suicidaron los osteoclastos
6.4.2. 2. Proliferación de las células progenitoras de osteoblastos
6.4.3. 3. Diferenciación en osteoblastos
7. Señalización
7.1. Las células dependen de múltiples moléculas de señal para su regulación
7.1.1. Por ejemplo, mandar a los osteoclastos a suicidarse
7.1.1.1. Cuando una celula deja de recibir señales de las células vecinas
7.1.1.1.1. Se suicida
7.1.2. Para sobrevivir, la celula necesita que le esten llegando señales de las células vecinas
7.1.3. Señales adicionales para que las células se dividan y proliferen
7.1.4. Otras señales para la difreneciaciòn
7.2. Tipos
7.2.1. Señalizaciòn por contacto celula-celula
7.2.1.1. Célula que envía el mensaje lo coloca en la cara externa de su membrana plasmática (puede ser una proteína, un lípido, etc.)
7.2.1.1.1. Las células que reciben este mensaje son las células vecinas
7.2.1.2. Molécula de señal nunca deja la molécula señalizadora
7.2.1.3. Óxido nítrico
7.2.1.3.1. Molécula de señal
7.2.2. Señalización paracrina
7.2.2.1. Molécula señal no esta pegada en la membrana
7.2.2.1.1. Es soluble y es capaz de viajar en el tejido y es recibido por las células vecinas en sus receptores
7.2.2.1.2. No abandona el tejido
7.2.3. Señalización autocrina
7.2.3.1. Células hablan consigo mismas
7.2.3.2. Célula produce una molécula de señal que es recibida por ella misma
7.2.3.3. Cuando pasa esto?
7.2.3.3.1. Célula recibe señal externa pero esta señal no es suficientemente fuerte para causar un efecto
7.2.4. Señalización endocrina
7.2.4.1. Célula productora de mensaje y la celula que recibe el mensaje se encuentran lejanas físicamente
7.2.4.1.1. Moléculas de señal entra al torrente sanguíneo y es recibida por células en el tejido cuya células posean los receptores para la molecula
7.2.4.2. células blanco unen y responden a una hormona liberada en la sangre por células especializadas secretorias usualmente presentes en una glándula.
8. Transducción de señales
8.1. Unión molécula señal con receptor es solo el inicio
8.1.1. Célula blanco tiene que tener un cambio en su comportamiento
8.1.1.1. Transduccion de señales
8.1.1.1.1. Cada receptor tiene asociada una serie de moléculas que le van a permitir generar un cambio en las proteínas efectoras