Geenitekniikan perusmenetelmiä

登録は簡単!. 無料です
または 登録 あなたのEメールアドレスで登録
Geenitekniikan perusmenetelmiä により Mind Map: Geenitekniikan perusmenetelmiä

1. Menetelmiä joiden avulla dna:ta voidaan eristää, tutkia, muokata ja siirtää

2. komplementaarinen dna

2.1. valmistetaan lähetti-rna:n emäsjärjestyksen perusteella käänteiskopioijaentsyymin avulla

2.2. Introneiden poisto

3. Tunnetuilla alukkeilla rajattujen alueiden monistus tutkittavasta dna:sta polymeraasi-entsyymin avulla.

4. Geenitekniikka

5. C-DNA

6. Katkaisuentsyymi

7. Liittäjäentsyymi

7.1. ligaasientsyymi

7.1.1. liittää katkaistut juosteet yhteen

7.1.2. korjaa juosteen sokerifosfaattirungon

8. Elektroforeesi

8.1. nukleiinihappomolekyylit kulkeutuvat sähkökentässä liikkumista hidastavassa geelissä

8.1.1. mitä lyhyempi molkyyli niin sitä nopeammin pääsee liikkumaan

8.1.2. negatiivisen varauksen omaavat nukleiinihapot liikkuvat geelissä kohti positiivista varausta

8.1.3. värjätty sopivalla väriaineella

8.2. käytetään dna- ja rna-palojen havaitsemiseen

9. sekvensointi

9.1. selvitetään dna:n emäsjärjestystä

9.1.1. reaktiossa on aloituskohdan määräävä aluke, tavallisia nukleotidejä ja rakentamisen päättäviä lopetusemäksiä

9.1.1.1. muokattu mahdottomaksi uusien nukleotidien littymiselle

9.1.1.1.1. syntyy kaikkia mahdollisia erimittaisia leimattuja pätkiä

9.2. jokainen neljä emästä värjätään eri värisiksi

9.3. sekvenssit yleensä tallennetaan jukkisiin tietokantoihin

9.3.1. muut tutkijat voivat vertailla ja poimia tietoja

10. tutkittavasta kudoksesta eristetään kaikki lähetti-rna-molekyylit

10.1. lähetti-rna muutetaan vastin-dna:ksi (komplementaarinen dna) käänteiskopioijaentsyymien avulla

10.1.1. liitetään väriaine komlementaariseen dna:han

11. restriktioentsyymi

11.1. pilkkoo dna:ta

11.2. bakteerien puolustuskeino bakteriofageja vastaan

11.3. katkaisukohdat voivat olla tahmeita tai tylppiä

12. dna-siru

13. PCR

13.1. Polymeraasiketjureaktio

13.2. Pienikin näyte saadaan monistettua tutkittavaksi

13.3. Vaiheet:

13.3.1. 1. Dna:n juosteiden irtoaminen toisistaan

13.3.2. 2. Alukkeiden hybridisaatio kohde-dna:han

13.4. Dna:n hybridisaatio

13.4.1. Toisiaan vastaavien yksijuosteisten dna-palojen pariutuminen emäsparisäännön mukaan

13.4.2. Käytetään tiettyä emäsjärjestystä vastaavien emäsjaksojen tunnistamiseen kohteesta

14. Aluke

14.1. Lyhyt yksijuosteinen dna-jakso

14.1.1. Noin kahdenkymmenen emäksen mittainen

14.1.2. Vastaa tiettyä emäsjärjestystä

14.2. Tarvitaan dna:n monistamiseen PCR-menetelmällä

14.2.1. Toimii dna-synteesin aloituskohtana dna-polymeraasille

15. koetin

15.1. Yksijuosteinen dna-pätkä, joka vastaa tutkittavaa aluetta

15.1.1. 3. Uuden dna-juosteen rakentuminen polymeraasin avulla

15.1.1.1. lasinen alustalevy, johon on kiinnitetty tutkittavien geenien emäsjärjestystä vastaavaa yksijuosteista dna:ta pieninä pisaroina tasaisin välimatkoin

15.1.1.1.1. lasille mahtuu tuhansia pisaroita

15.1.1.1.2. tutkitaan geenin ilmentymista l-Rnan avulla

15.2. Merkitseminen

16. ifiqhfoiiq

17. hah