Extracción y purificación de ácidos nucleicos

Tema 3 biología

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Extracción y purificación de ácidos nucleicos af Mind Map: Extracción y purificación de ácidos nucleicos

1. Pretratamiento de las muestras biológicas

1.1. Sangre

1.1.1. Lisis de los hematíes

1.1.2. Consideraciones sobre la obtención y conservación de la muestra

1.1.3. Obtención de células mononucleadas de sangre periférica

1.2. Cultivos celulares

1.2.1. Tejidos animales o vegetales frescos

1.2.1.1. Homogeneización química

1.2.1.2. Homogeneización mecánica

1.2.1.2.1. Mecánica automatizada

1.2.1.2.2. Mecánica manual con mortero

1.2.2. Tejidos fijados en formol e incluidos en parafina

1.2.2.1. Desparafinización

2. Sistemas de automáticos de extracción de ácidos nucleicos

2.1. Automatización del proceso de extracción/purificación

2.2. Ventajas de la automatización

2.3. Tipos de instrumentos automáticos

3. Calidad y concentración del ADN obtenido

3.1. Integridad de los ácidos nucleicos

3.2. Pureza de los ácidos nucleicos

3.3. Concentración de ácidos nucleicos

4. Técnicas de extracción y purificación de ADN en sangre, biopsias y tejidos

4.1. Solución de lisis

4.1.1. Detergentes

4.1.2. EDTA

4.1.3. Proteasas

4.1.4. Agentes caotrópicos

4.2. Tratamiento en células con pared celular

4.2.1. Tratamiento enzimático

4.2.2. Tratamiento mecánico

4.2.3. Tratamiento con CTAB

4.3. Purificación de los ácidos nucleicos

4.3.1. Con solventes orgánicos

4.3.1.1. Eliminación de compuestos solubles orgáicos

4.3.1.2. Precipitación del ADN

4.3.1.3. Lavado del ADN

4.3.1.4. Resuspensión del ADN

4.3.2. Con sales (salting-out)

4.3.2.1. Precipitación de proteínas

4.3.2.2. Precipitación del ADN

4.3.2.3. Lavado y resuspensión del ADN